接种的要求及注意事项
外植体的制备 在无菌条件下,将消毒过的实验材料切成小块,制备外植体。例如,胡萝卜根的制备方法是:用解剖刀将小段的胡萝卜根切去四周,留下中间带形成层的部分,切成1 cm×1 cm的小方片。又如,菊的制备方法是:切去叶柄,将叶片从叶脉处剪开,再切成3~4 mm2的小块;嫩茎需切取两个节之间的节间部分,长约1 cm。切取的外植体要放入无菌培养皿中。
接种时的注意事项
第一,每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为75%的酒精溶液中消毒1次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种。注意,沾有酒精的镊子要等到酒精挥发完后,再放到酒精灯火焰上灼烧。
第二,外植体放入培养基时,必须放平。每瓶放置外植体的数量,应该根据锥形瓶的大小来确定,一般放置胡萝卜3~4块,菊的茎或叶6~8块。注意外植体也不要放得太少,以充分利用培养基中的营养成分。
第三,接种用的酒精灯,火焰不要调得太高,接种时应靠近酒精灯火焰操作,接种的速度要快。
第四,接种时严防接种箱内着火。
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